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産業動物防疫リサーチセンター |
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論文 【 表示 ／ 非表示 】
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Importance of continuous monitoring of bovine leukaemia virus infection on farms in bovine leukaemia virus-endemic areas of Japan. 査読あり 国際誌
Chikako Tani, Jiazhou Li, Hirohisa Mekata, Kazuhiro Morishita, Shingo Nakahata
Veterinary record open 12 ( 2 ) e70014 2025年12月
記述言語：英語 掲載種別：研究論文（学術雑誌）
BACKGROUND: Enzootic bovine leukosis (EBL), caused by the bovine leukaemia virus (BLV), has exhibited increasing infection rates in Japan. While many farms implement various infection prevention measures, practical challenges-such as barn structure and availability of replacement cattle-can hinder farm purification efforts. This study aimed to determine whether continuous monitoring of BLV proviral load (PVL) in cattle on a farm could be effective in tracking BLV infection dynamics, identification of BLV infection sources and the dynamics of BLV PVL enrichment on-farm. METHODS: Bovine leukaemia virus infection was monitored over a 3-year period in approximately 10% of cattle at a test farm located in Miyazaki Prefecture, an endemic area for BLV in southern Kyushu, Japan. Eight calves and five adult cows were included to assess vertical and horizontal transmission of BLV. RESULTS: All calves developed new BLV infections, which were traced to the nursing/growing barn, the dry/new milking barn at the Miyazaki farm, and the point of deposit in Hokkaido, Japan, for rearing and artificial insemination. In BLV-positive adult cows, an increasing trend in PVL was observed. These findings indicate that continuous monitoring of a subset of cattle enables effective tracking of infection dynamics and identification of infection sources; thus, supporting the implementation of targeted prevention measures. CONCLUSIONS AND CLINICAL IMPORTANCE: Despite heightened awareness among farmers regarding livestock quarantine, consistent and long-term control of BLV infections remains challenging. The results underscore the necessity of expert-guided management strategies tailored to BLV control, informed by ongoing infection monitoring. This study highlights husbandry management factors, including barn structure and cattle boarding practices, and provides new insights into the transmission routes of BLV in Japan.
DOI： 10.1002/vro2.70014
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Hirohisa Mekata, Mari Yamamoto, Yasuyuki Kaneko, Kentaro Yamada, Tamaki Okabayashi, Akatsuki Saito
Pathogens 14 ( 3 ) 254 - 254 2025年3月
担当区分：筆頭著者, 責任著者 記述言語：英語 掲載種別：研究論文（学術雑誌） 出版者・発行元：MDPI AG
Severe fever with thrombocytopenia syndrome (SFTS), caused by infection with the SFTS virus, is an emerging fatal tick-borne zoonosis endemic to East Asia. Although SFTS is a tick-borne disease, the virus can be transmitted from animals with SFTS without a tick bite. Direct transmission of the SFTS virus from animals to humans has been reported; however, the transmission route is unclear in some cases. Therefore, this study focused on the possibility of SFTS virus transmission through urine and attempted to isolate the infectious virus from the urine of animals with SFTS. Since more efficient cell isolation is needed to determine whether the SFTS virus is present, we first expressed dendritic cell-specific ICAM-3-grabbing nonintegrin (DC-SIGN), the major receptor for the virus, in Vero cells (Vero-DC-SIGN cells) using a retroviral vector. When inoculated with equal amounts of the SFTS virus strain and SFTS-virus-infected animal serum, Vero-DC-SIGN cells had 42–136% and 20–85% more foci, respectively, than their parent Vero cells. After confirming that Vero-DC-SIGN cells were more suitable for the isolation of the SFTS virus, we investigated whether it could be isolated from the urine of eight cats and two dogs with SFTS. The virus was isolated from 25 μL of urine from two cats with SFTS. Considering that cats excrete 50–100 mL of urine per day, the transmission of the SFTS virus via the urine of cats with SFTS cannot be ruled out. Individuals examining or caring for cats suspected of having SFTS should be aware of the possibility of viral transmission via urine.
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Tomohiro OKAGAWA, Naomi NOJIRI, Hazuka YOSHIDA-FURIHATA, Naganori NAO, Misono TOMINAGA, Junko KOHARA, Satoshi GONDAIRA, Hidetoshi HIGUCHI, Yohei TAKEDA, Haruko OGAWA, Shinji YAMADA, Kenji MURAKAMI, Yasunori SUZUKI, Shinji TAKAI, Masaki MAEZAWA, Hisashi INOKUMA, Kaori SHIMIZU, Yasuo INOSHIMA, Tatsufumi USUI, Michihito TAGAWA, Mari YAMAMOTO, Hirohisa MEKATA, Mana ESAKI, Makoto OZAWA, Takahiro MATSUDAIRA, Naoya MAEKAWA, Shiro MURATA, Kazuhiko OHASHI, Masumichi SAITO, Satoru KONNAI
Journal of Veterinary Medical Science 87 ( 5 ) 551 - 558 2025年3月
記述言語：英語 掲載種別：研究論文（学術雑誌） 出版者・発行元：Japanese Society of Veterinary Science
Bovine leukemia virus (BLV), a retrovirus that is widespread worldwide, causes enzootic bovine leukosis (EBL), a B-cell leukemia/lymphoma with a poor prognosis that ultimately results in death. In Japan, the number of cattle infected with this virus is increasing, and it is estimated more than 35% of cattle are currently infected. Since no vaccines or treatments against BLV infection are currently available, it is important to establish a method of early diagnosis for EBL to reduce economic losses caused by the disposal of EBL cattle in Japan, where a large number of expensive beef cattle are raised. We previously developed Rapid Amplification of the Integration Site without Interference by Genomic DNA Contamination (RAISING), a cost-effective, rapid, and sensitive method for the clonality analysis of BLV-infected cells. Despite its usefulness for the early diagnosis of EBL, RAISING had drawbacks preventing its practical application. Here, we report the development of an improved method, RAISING ver.2, and its performance. Compared to BLV clonality analysis using the previous method, RAISING ver.2 was found to maintain high accuracy and reproducibility despite its simplification. Moreover, its performance was also validated in a multicenter validation study. Taken together, our results strongly suggest that RAISING ver.2 can be fully utilized in clinical practice. Successful commercialization of a RAISING test kit could overcome the concerns of livestock farmers suffering from EBL, thereby promoting a stable supply of Japanese beef, both domestically and internationally.
DOI： 10.1292/jvms.25-0031
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Direct TaqMan assay for the detection and genotyping of bovine viral diarrhea virus types 1 and 2 査読あり 国際共著 国際誌
Shakir Ullah, Kosuke Notsu, Akatsuki Saito, Tamaki Okabayashi, Hirohisa Mekata, Norikazu Isoda, Satoshi Sekiguchi
Archives of Virology 170 ( 1 ) 1 - 10 2025年1月
記述言語：英語 掲載種別：研究論文（学術雑誌） 出版者・発行元：Springer Science and Business Media LLC
Abstract
Bovine viral diarrhea (BVD), caused by bovine viral diarrhea virus (BVDV), has a significant economic impact on affected farms worldwide. For effective disease control, it is crucial to select an appropriate vaccine based on the specific genotype of BVDV. Therefore, developing a rapid and reliable assay to detect and genotype BVDV is imperative for controlling the spread of disease. In this study, we developed a TaqMan assay to detect and genotype BVDV types 1 and 2 directly in bovine serum without extraction of RNA. The direct BVDV TaqMan assay effectively detected both BVDV1 and BVDV2 with confirmed specificity and showed no cross-reactivity with any of the other viruses tested, including bovine respiratory syncytial virus, bovine coronavirus, Akabane virus, bovine herpesvirus 1, bovine parainfluenza virus 3, bovine immunodeficiency virus, and bovine leukemia virus. The assay could detect the virus in serum samples with a titer as low as 10<sup>2</sup> TCID<sub>50</sub>/mL in two out of three trials for BVDV1 and all three trials for BVDV2, indicating that its sensitivity is equivalent to that of virus isolation. Our findings represent a significant advancement in BVDV detection and typing directly from bovine serum.DOI： 10.1007/s00705-024-06207-z
その他リンク： https://link.springer.com/article/10.1007/s00705-024-06207-z/fulltext.html
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MALDI-TOF MS analysis for detection of bovine coronavirus with tryptic peptides from viral proteins. 査読あり 国際誌
Katsuhiko Hayashi, Kenji Ohya, Tomoya Yoshinari, Shouhei Hirose, Souta Shimizu, Yuji Morita, Takahiro Ohnishi, Maiko Watanabe, Satoshi Taharaguchi, Hirohisa Mekata, Takahide Taniguchi, Yukiko Hara-Kudo
Journal of microorganism control 29 ( 4 ) 143 - 151 2024年12月
記述言語：英語 掲載種別：研究論文（学術雑誌）
Bovine coronavirus (BCoV）, a significant cattle pathogen causing enteric and respiratory diseases, is primarily detected using reverse transcription-polymerase chain reaction. Our objective was to develop a novel detection method for BCoV by matrix-assisted laser desorption/ionization‒time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS）. Peptide mass fingerprint analysis revealed that nucleocapsid (N）, membrane (M）, and hemagglutinin-esterase (HE) were three main BCoV proteins. Their tryptic peptides were used as target molecules for BCoV detection. When the tryptic digest of 107.0 viral copies was analyzed by MALDI-TOF MS, five peptides with relatively strong peaks were detected. The detection limit was between 105.0 and 106.0 copies per test for BCoV alone. To detect BCoV in the swab eluate, ultrafiltration purification achieved a detection limit between 106.0 and 107.0 copies per test, sufficient to detect BCoV-infected calves. Our findings offer valuable insights for BCoV detection by MALDI-TOF MS.
DOI： 10.4265/jmc.29.4_143
書籍等出版物 【 表示 ／ 非表示 】
MISC 【 表示 ／ 非表示 】
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MALDI-ToF MSによる鼻咽頭拭い液中のSARS-CoV-2の直接検出法の開発
林克彦, 吉成知也, 廣瀬昌平, 大屋賢司, 大西貴弘, 渡辺麻衣子, 田原口智士, 目堅博久, 谷口隆秀, 前田卓哉, 折原悠太, 川村利江子, 新井沙倉, 斎藤嘉朗, 合田幸広, 工藤由起子
日本薬学会年会要旨集(Web) 143rd 2023年
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牛伝染性リンパ腫の診断と早期発症予測法の開発
富永みその, 今内覚, 岡川朋弘, 神谷可菜, 齋藤麻矢, 安富一郎, 目堅博久, 前川直也, 村田史郎, 大橋和彦
北海道獣医師会雑誌 67 ( 8 ) 2023年
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MALDI-ToF/MSによるSARS-CoV-2の新規検出法の開発
廣瀬昌平, 吉成知也, 林克彦, 大屋賢司, 大西貴弘, 渡辺麻衣子, 田原口智士, 目堅博久, 谷口隆秀, 新井沙倉, 合田幸広, 工藤由起子
日本獣医学会学術集会講演要旨集 165th (CD-ROM) 2022年
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次世代シーケンス(NGS)を用いた豚糞便中のウイルス検索:新しいBastrovirus遺伝子の発見
長井誠, 岡林環樹, 松鵜彩, 藤本佳万, 目堅博久, 中尾亮, 浅井鉄夫, 中川敬介, 伊藤壽啓, 野中成晃, 小原恭子, 猪島康雄, 水谷哲也, 三澤尚明
日本獣医学会学術集会講演要旨集 163rd 2020年
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プロウイルス量に基づいた牛白血病対策ノススメ
目堅博久
家畜感染症学会誌 7 ( 4 ) 163 - 168 2018年12月
記述言語：日本語 掲載種別：記事・総説・解説・論説等（大学・研究所紀要）
講演・口頭発表等 【 表示 ／ 非表示 】
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Studies on emerging tick-borne viral diseases in companion and wild animals in Japan 招待あり 国際会議
Hirohisa Mekata
Faculty of Veterinary Medicine - Seminar for NCM Microbiology - Veterinary Infectious Diseases: (Hanoi, Vietnam) 2025年3月18日 Faculty of Veterinary Medicine, Vietnam National University of Agriculture
開催年月日： 2025年3月18日
記述言語：英語 会議種別：公開講演，セミナー，チュートリアル，講習，講義等
開催地：Hanoi, Vietnam 国名：ベトナム社会主義共和国
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伴侶動物と野生動物のSFTS
目堅博久
第2回RCGLID&CADIC共同セミナー (大分大学) 2024年12月2日 大分大学グローカル感染症研究センター（RCGLID）
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2021-23年度に宮崎⼤学で実施した伴侶動物の SFTS 検査
目堅博久, 金子泰之, 平井卓哉, 梅木一美, 梅北邦彦, 山田健太郎, 岡林環樹
第6回SFTS研究会 (札幌市) 2024年9月14日 SFTS研究会
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Urine from cats with severe fever with thrombocytopenia syndrome could be an infectious source 国際会議
Hirohisa Mekata, Yasuyuki Kaneko, Kentaro Yamada, Tamaki Okabayashi, Akatsuki Saito
The 4th Joint Meeting of Veterinary Science in East Asia (Obihiro) 2024年9月8日 The Japanese Society of Veterinary Science
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プロウイルス量を使った繁殖農場でのBLV対策と課題 招待あり
目堅博久
第64回獣医疫学会学術集会(シンポジウム) (オンライン) 2024年8月31日 獣医疫学会
受賞 【 表示 ／ 非表示 】
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日本獣医学会獣医学奨励賞
2013年3月 日本獣医学会
目堅 博久
受賞区分：国内学会・会議・シンポジウム等の賞 受賞国：日本国
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第１５５回日本獣医学会大会長賞
2013年3月 日本獣医学会
目堅 博久
受賞区分：国内学会・会議・シンポジウム等の賞 受賞国：日本国
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2024年度宮崎銀行ふるさと振興助成事業 学術研究部門
2025年3月 一般財団法人みやぎん経済研究所 伴侶動物におけるSFTSの実態解明
目堅博久
受賞区分：出版社・新聞社・財団等の賞 受賞国：日本国
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日本産業動物獣医学会九州地区学会長賞
2014年10月 日本産業動物獣医学会
目堅 博久
受賞区分：国内学会・会議・シンポジウム等の賞 受賞国：日本国
科研費（文科省・学振・厚労省）獲得実績 【 表示 ／ 非表示 】
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マダニが保有するＭ分節欠損フェヌイウイルスの生物学的意義の解明
研究課題/領域番号：25K22364 2025年06月 - 2027年03月
日本学術振興会 科学研究費助成事業 挑戦的研究(萌芽)
目堅 博久, 齊藤 暁, 松本 祐介
担当区分：研究代表者
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動物フォーミーウイルスベクターの基盤構築と牛伝染性リンパ腫ワクチンの開発
研究課題/領域番号：23K23765 2024年04月 - 2026年03月
独立行政法人日本学術振興会 科学研究費基金 基盤研究(B)
担当区分：研究代表者
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ベトナムにおけるアフリカ豚熱の実践的な高感度診断法の開発と環境動態の解明
研究課題/領域番号：22KK0097 2022年04月 - 2027年03月
独立行政法人日本学術振興会 科学研究費基金 国際共同研究加速基金(国際共同研究強化(B))
担当区分：研究分担者
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動物フォーミーウイルスベクターの基盤構築と牛伝染性リンパ腫ワクチンの開発
研究課題/領域番号：22H02500 2022年04月 - 2026年03月
日本学術振興会 科学研究費補助金 基盤研究(B)
目堅 博久
担当区分：研究代表者
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共生レトロウイルスの抗腫瘍ポテンシャルの解明と有効活用
研究課題/領域番号：20H03150 2020年04月 - 2024年03月
独立行政法人日本学術振興会 科学研究費補助金 基盤研究(B)
宮沢 孝幸, 中川 草, 目堅 博久
担当区分：研究分担者
ほぼすべてのレトロウイルスは宿主に様々な重篤な疾病を引き起こし、獣医臨床上大きな問題となっている。ところが、レトロウイルスの一種であるフォー ミーウイルスは、宿主に終生持続感染するものの、いかなる疾病を引き起こさない。最近我々はニホンザル由来のフォーミーウイルスが、がんを抑制するマイク ロRNA（miRNA）を感染細胞で大量に産生することを見出した。本研究は、フォーミーウイルス由来miRNAの抗腫瘍ポテンシャルに着目し、このウイルスがいかにして宿主にがんを引き起こすことなく宿主と共存しているのかを明らかにする。また、フォーミーウイルスが宿主のmiRNA産生系を乗っ取り、大量のmiRNAを産生す るメカニズムを明らかにする。そしてこれらの知見を利用して、腫瘍抑制性miRNAを強力に発現しうる新規ウイルスベクターを開発し、家畜や伴侶動物を対象とした新規がん治療法へ道を拓く。
これまでに、様々な霊長類（ニホンザル、タイワンザル、アカゲザルなど）からSFVを、ネコ科動物（イエネコ、イリオモテヤマネコ、ベンガルヤマネコなど） からFFVを分離している。今回、イエネコ由来FFVの塩基配列（特にmiRNAを産生することが 予想されるLTR配列）を決定し、in silico解析により産生されるmiRNAを予測した。 FFVをネコ由来株化細胞（CRFK細胞）に感染させ、CRFK持続感染細胞を得た。さらに非感染細胞及び持続感染細胞からmRNAならびに短鎖RNAを抽出し、網羅的な転写産物解析（トランスクリプトーム解析）を行った。そして、短鎖RNAの配列をフォーミーウイルスの塩基配列にマップし、FFV由来のmiRNAを特定した。また同定したmRNA配列の解析により、ウイルス由来miRNAの標的となる宿主mRNAを推測した。
その他競争的資金獲得実績 【 表示 ／ 非表示 】
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医獣連携による重症熱性血小板減少症候群の病態機序の解明
研究課題/領域番号：22682778 2022年07月 - 2023年03月
国立研究開発法人日本医療研究開発機構 日本医療研究開発機構研究費 新興・再興感染症に対する革新的医薬品等開発推進研究事業
目堅博久
担当区分：研究分担者
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網羅的ジェノタイピングによる新規牛白血病抵抗性遺伝子の同定
2019年04月 - 2022年03月
伊藤記念財団 伊藤記念財団研究助成
担当区分：研究代表者 資金種別：競争的資金
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牛白血病ウイルス高感染牛の予後の評価
2015年04月 - 2016年03月
伊藤記念財団 伊藤記念財団研究助成
資金種別：競争的資金
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牛白血病ウイルスの垂直伝播に関する研究
2014年04月 - 2015年03月
伊藤記念財団 伊藤記念財団研究助成
担当区分：研究代表者 資金種別：競争的資金
牛白血病ウイルスの垂直伝播に関する研究
受託研究受入実績 【 表示 ／ 非表示 】
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次亜塩素酸ナトリウム（製品名：SteriNa)によるSARS-CoV-2不活化試験
2020年12月 - 2021年06月
SSP株式会社 一般受託研究
担当区分：研究分担者 受託研究区分：一般受託研究
共同研究実施実績 【 表示 ／ 非表示 】
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渡り鳥飛来湖沼水を用いた鳥インフルエンザウイルス検出手法の確立とその実用化に係る研究
2024年06月 - 2025年05月
株式会社AdvanSentinel 国内共同研究
山田 健太郎、目堅 博久
担当区分：研究分担者 共同研究区分：国内共同研究
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離島における牛伝染性リンパ腫対策法の確立
2023年08月 - 2025年03月
喜界町農業振興課 国内共同研究
担当区分：研究代表者 共同研究区分：国内共同研究